CRISPR Design — проектирование sgRNA и плеч гомологии для целевого гена в вашем штамме

Выберите штамм и целевой ген — получите ранжированные кандидаты sgRNA с PAM, баллом активности и риском нецелевых сайтов, а также левое и правое плечи гомологии.

01

Как это работает

От штамма и мишени к полному плану редактирования — пять этапов, каждый отмечен в этой записи.

  1. 01

    Выбор штамма

    Выберите из библиотеки 30 штаммов: бактерии, дрожжи и мицелиальные грибы.

  2. 02

    Выбор мишени

    Найдите ген по имени или ключевому слову, просмотрите повторы или вставьте голую последовательность ДНК.

  3. 03

    Проектирование sgRNA

    Сканирование PAM, оценка активности и ранжирование риска нецелевых сайтов.

  4. 04

    Проектирование плеч гомологии

    Построение левого и правого плеч с проверкой копийности и разрушением PAM.

  5. 05

    Экспорт

    Скопируйте формат заказа sgRNA и скачайте FASTA плеч гомологии.

02

Возможности

Библиотека 30 штаммов

Бактерии, дрожжи и мицелиальные грибы, каждый со штамм-специфичной аннотацией.

Оценка активности и нецелевые сайты

Ранжирование по баллу Azimuth и отметка попаданий MM0/MM1/MM2+.

Разрушение PAM

Синонимичные замены PAM внутри плеч для защиты от повторного разрезания Cas9.

Длина плеч по виду

Длина плеч гомологии по умолчанию и рекомендация настраиваются под штамм.

CRISPRsgRNAплечо гомологииPAMнецелевые сайтынокаут гена
03

Ввод

Выберите штамм, укажите целевой ген (или вставьте последовательность) и запустите проектирование.

Организм-хозяин для редактирования. Штаммы без аннотации используют референсный штамм.

Стандартное имя, систематическое имя, locus_tag или ключевое слово функции.

При заполнении используется вместо поиска гена. Генный режим также проектирует плечи гомологии.

Применяется к проектированию плеч в генном режиме.

Запускается на живом движке.
04

Ход проектирования

Наблюдайте за продвижением по этапам.

Ожидание ввода
    05

    Результат

    Ранжированные кандидаты sgRNA и плечи гомологии с копийностью и разрушением PAM.

    06

    Рабочее пространство

    Сохранить запуск в рабочее пространство

    Каждый сохранённый запуск становится воспроизводимой записью с Entry ID для цитирования в методиках. Передача в дизайнер экспрессионных кассет предзаполнит последовательность guide.

    Сначала запустите проектирование, затем сохраните.